液相色譜等度和梯度有什么區(qū)別
等度洗脫是指實(shí)驗(yàn)過(guò)程中（做樣過(guò)程）從頭到尾只用一種流動(dòng)相。也就是只用一個(gè)泵，輸送同一種流動(dòng)相。
梯度洗脫是指在同一個(gè)分析周期中隨著時(shí)間的變化按一定程序梯度性地改變洗脫液的比例（濃度配比、成分、離子強(qiáng)度、溶液極性等）或pH，以期將層析柱上不同的組分洗脫出來(lái)的方法。從而可以使一個(gè)復(fù)雜樣品中性質(zhì)（極性）差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達(dá)到良好的分離目的。梯度洗脫一般分為二元高壓梯度，二元低壓梯度和四元低壓梯度；二元高壓梯度需要兩臺(tái)高壓泵，二元低壓梯度和四元低壓梯度都是只需 要一臺(tái)高壓泵和一個(gè)比列閥。
配置特點(diǎn)：
1. 等度洗脫只需要配置一臺(tái)高壓泵，配置相對(duì)簡(jiǎn)單，成本低；
2. 二元高壓梯度洗脫需要配置兩臺(tái)高壓泵，一個(gè)混合器及連接管理，配置較高，成本高；
3. 二元低壓梯度洗脫需要配置一臺(tái)高壓泵、一個(gè)二元比例閥、一臺(tái)在線脫氣機(jī)、一個(gè)混合器（脫氣機(jī)和混合器視情況而定，可不選）及連接管路，配置較低，成本較低；
4. 四元低壓梯度洗脫需要配置一臺(tái)高壓泵、一個(gè)四元比例閥、一臺(tái)在線脫氣機(jī)、一個(gè)混合器（視情況而定，可不選）及連接管路，配置較高，成本較低。
優(yōu)缺點(diǎn)：
1.等度洗脫優(yōu)點(diǎn)：流速不發(fā)生變化，壓力穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠；
缺點(diǎn)：多組分檢測(cè)或有雜質(zhì)干擾情況下分離度可能會(huì)差，而且不容易優(yōu)化，對(duì)于某些復(fù)雜樣品分析時(shí)間長(zhǎng)，峰形差。
2.二元高壓梯度洗脫優(yōu)點(diǎn)：每臺(tái)泵的流速都由程序控制，a.多組分檢測(cè)或有雜質(zhì)干擾情況下提高分離能力，b.縮短某些復(fù)雜樣品的分析時(shí)間，c.改善峰形，減少拖尾，d.提高柱效，增加檢測(cè)靈敏度；
缺點(diǎn)：
a.流速變化得由程序控制，有時(shí)會(huì)出錯(cuò)。
b.壓力可能會(huì)不穩(wěn)定。
c.混合時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生氣泡，影響基線噪聲及漂移。
d.高壓混合時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生熱量。
e.對(duì)混合器要 求很高，如果混合不好，基線噪聲和漂移會(huì)很大。
f.由于流動(dòng)相比例發(fā)生變化，基線可能會(huì)漂移。
g.實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性沒(méi)有等度高。
h.故障率高于等度。
3.二元低壓梯度優(yōu)點(diǎn)：只需一臺(tái)泵一個(gè)比例閥，就能達(dá)到梯度洗脫效果；
缺點(diǎn)：低壓混合可能會(huì)產(chǎn)生氣泡，梯度穩(wěn)定性和準(zhǔn)確度不高。
4.四元低壓梯度優(yōu)點(diǎn)：只需一臺(tái)泵和一個(gè)比列閥，就能達(dá)到梯度洗脫效果，并且同時(shí)可以控制四種流動(dòng)相。
缺點(diǎn)：低壓混合可能會(huì)產(chǎn)生氣泡，需要加在線脫氣機(jī)，梯度穩(wěn)定性和準(zhǔn)確度不高，對(duì)比列閥要求很高，梯度滯后體積大。
檢測(cè)要求：不同物質(zhì)（所測(cè)物質(zhì)）分離度一定要好，峰形要好，分析時(shí)間要短，穩(wěn)定性、準(zhǔn)確度盡量高，實(shí)驗(yàn)成本盡量低等等。
配置建議：
1.采樣高效液相色譜法實(shí)驗(yàn)時(shí)，對(duì)儀器的配置一般盡量簡(jiǎn)單。儀器配置復(fù)雜后，操作就會(huì)復(fù)雜，穩(wěn)定性、準(zhǔn)確度可能會(huì)受影響，故障率就會(huì)高，使用成本也會(huì)高。在能達(dá)到較好的分離度及峰形的情況下能用等度就用等度；
2.同時(shí)檢測(cè)多種復(fù)雜成分，或是有干擾物的情況下，為達(dá)到滿意的峰形、分離度、分析時(shí)間，就得使用梯度洗脫方式了。各種成分可以使用不同比例的流動(dòng)相進(jìn)行洗脫，如農(nóng)殘檢測(cè)、氨基酸檢測(cè)等。要求高的話采用高壓梯度洗脫，要求低的話采用低壓梯度洗脫；
3.流動(dòng)相種類相對(duì)簡(jiǎn)單的話采用二元低壓梯度洗脫，相對(duì)復(fù)雜的話（如洗脫時(shí)需要四種不同溶液的流動(dòng)相）采用四元低壓梯度洗脫。
