色譜柱的平衡常識(shí)
在我們把柱子安裝到儀器中前，必須確認(rèn)儀器中原有管路中的試劑跟色譜柱保存試劑是相容的。如果不相容，需要在接上柱子前先打開(kāi)purge閥把儀器管路中的試劑過(guò)渡并切換成與色譜柱保存試劑相容的試劑。
特別需要關(guān)注系統(tǒng)正反相切換的時(shí)候：對(duì)于反相色譜柱，可能會(huì)因?yàn)檎聪嗖幌嗳荻菇酉氯サ膶?shí)驗(yàn)出現(xiàn)不可估計(jì)的異?，F(xiàn)象；而對(duì)于正相硅膠柱，或者氧化鋁色譜柱，或者某些涂覆型手性柱，它們對(duì)水非常敏感，很可能會(huì)讓接下去的實(shí)驗(yàn)中讓色譜峰嚴(yán)重變形，并且可能對(duì)色譜柱造成不可逆的損壞，所以在正反相的切換中需要切換完全。不管是正相切換到反相還是反相切換到正相，第一步都是把系統(tǒng)中原有的酸、堿、或者其他添加劑置換完全，然后過(guò)渡到乙醇/異丙醇或者其他過(guò)渡溶劑；最后置換成接下去所需使用的體系。
即便都是在反相色譜中的切換，也需要過(guò)渡完全。通常，反相色譜柱會(huì)保存在純甲醇或者純乙腈當(dāng)中，反相色譜流動(dòng)相緩沖液中很多情況下會(huì)加入緩沖鹽，如果不經(jīng)過(guò)置換，含鹽緩沖液與純有機(jī)相相遇，很容易產(chǎn)生鹽析。一旦產(chǎn)生鹽析，很可能損壞柱床。為了避免這種情況的發(fā)生，在過(guò)渡到所使用的帶緩沖鹽的流動(dòng)相前，先使用1~3個(gè)柱體積的50%體積比的甲醇水過(guò)渡一下，然后再轉(zhuǎn)到緩沖鹽體系平衡即可。
同理，因?yàn)檎和橹荒芨状?乙腈只能部分混溶，用于正相體系保存的正己烷過(guò)渡到反相，需要合適的溶劑過(guò)渡；而用水相緩沖液保存的離子交換柱的過(guò)渡，也需要合適的溶劑過(guò)渡.一般來(lái)說(shuō)10~20柱體積的平衡就可讓色譜柱達(dá)到平衡狀態(tài)。當(dāng)然，在使用了離子對(duì)或者胺類改性劑的體系中，平衡時(shí)間需要適當(dāng)延長(zhǎng)，以達(dá)到完全平衡的目的。
